Эксперимент проведен на 60 половозрелых беспородных белых крысах-самцах с индуцированным CCL4 циррозом печени. Распределение крыс по опытным и контрольным группам, сроки выведения из опыта представлены в схеме эксперимента (Таблица 1).
Оценка репаративных процессов у животных проводилась на основании изучения морфофункционального состояния печени и определение функциональной активности перитонеальных макрофагов. Данные показатели оценивали в опытных и контрольных группах животных в указанные сроки и сравнивали с оценкой достоверности различий двух независимых выборок по непараметрическому критерию Колмогорова-Смирнова.
Морфологические критерии:
Для морфологического исследования динамики регрессии ЦП во всех наблюдениях проведена оценка степени выраженности 10 важнейших гистологических признаков ЦП, отражающих состояние дистрофических, воспалительно-некротических, склеротических и регенераторных процессов в печени.
Учитывали следующие гистологические признаки, оцениваемые на глаз в баллах от 1 до 4-х:
- Жировая дистрофия гепатоцитов
- Содержание гликогена в цитоплазме гепатоцитов
- Некроз печеночных клеток
- Гипертрофия ядер гепатоцитов
- Гиперплазия ядер гепатоцитов
- Пролиферация эпителия желчных протоков
- Пролиферация звездчатых ретикулоэндотелиоцитов
- Воспалимтельно-клеточная инфильтрация трактов и паренхимы
- Фиброз
- Число ложных долек
Биохимические критерии:
Для оценки процессов холестаза и цитолиза в паренхиме печени определяли уровень би-лирубина и активность аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ) сыворотки крови.
Критерии определения функциональной активности перитонеальных макрофагов:
Функциональную активность перитонеальных макрофагов определяли следующие показа-тели: цитограмма, лизосомальная активность, активность и интенсивность фагоцитоза, фагоцитарное число.
Полученные в эксперименте данные позволили сделать следующие выводы:
- Трансплантация аллогенных фетальных тканей печени животным с экспериментальным циррозом стимулирует процессы репаративной регенерации и способствует восстановлению морфофункционального состояния печени.
| Узловая трансформация паренхимы печени с формированием ложных долек. Множественные ложные дольки разделенные фибриозными септами. |

|

|

|
| Морфологическая картина через 30 дней с момент стимуляции регенерации; резко выраженная гипертрофия ядер гепатоцитов. |

|

|
| Морфологическая картина через 75 дней с момент стимуляции регенерации; узкие фиброзные септы, нормализация гистиоархитектоники печени. |
- Интенсивность морфологических проявлений регенерации печеночной ткани при трансплантации фетальных тканей выше, чем при хирургической стимуляции регенерации, что косвенно свидетельствует о более сильном стимулирующем влиянии на репаративную регенерацию печени.
- Эффективность стимуляции репаративной регенерации подтверждает нормализация биохимических показателей сыворотки крови у экспериментальных животных с ЦП.
Изменения показателя билирубина в процессе эксперимента
|
Изменения показателя активности АлАТ в процессе эксперимента
|
Изменения показателя активности АсАТ в процессе эксперимента
|
- Нарушение клеточной макрофагальной активности формирующееся при ЦП, быстрее восстанавливается при стимуляции репаративной регенерации, что указывает на прямую взаимосвязь процессов, происходящих в печени с одним из основных показателей клеточного иммунитета.
Положительные результаты эксперимента позволили применить данный метод в клинической практике. Метод имплантации фетальных тканей человека разрешен к применению МЗ РФ (лицензия Главного Медицинского Управления Москвы и лицензионной палаты ВМ № 1101 - 1097), на него выдана лицензия ЛАКО Челябинской области № 136. Соблюдены международные нормы при заборе, хранении фетального материала, обследовании донора [12, 19, 21]. Реципиент полностью информирован обо всех известных медицинских и личных интересах в соответствии с "Хельсинской декларацией", "Принципами медицинской этики", принятой Генеральной Ассамблеей ВОЗ (резолюция 37/194) 1982 года. На применяемый метод лечения получен патент на изобретение № 2161036, приоритет от 13.10.98.
В настоящем сообщении приведены данные клинического применения ТФТЧ при лечении хронических гепатитов и циррозов печени.